Human MRP5 Vesikel-Kit – Inside-Out-Membranvesikel für ubiquitäre organische Anionen- und zyklische Nukleotid-Transportstudien

Das Human MRP5 Vesikel-Kit (HEK293-abgeleitet) liefert gebrauchsfertige Inside-Out-Membranvesikel für ATP-abhängige Transportstudien von MRP5 (ABCC5). Im Gegensatz zu anderen MRPs mit organspezifischer Expression wird MRP5 ubiquitär im Körper exprimiert und verarbeitet zyklische Nukleotide, Nukleotidanaloga und organische Anionen. Es ist besonders relevant für antivirale und onkologische Nukleosidanaloga und wurde an der Blut-Hirn-Schranke identifiziert.

Transporterprofil

MRP5 (ABCC5) wird ubiquitär in Herz, Gehirn, Skelettmuskel, Hoden und vielen anderen Geweben exprimiert. Es transportiert zyklische Nukleotide (cAMP, cGMP), organische Anionen, Glutathionkonjugate und Nukleosidmonophosphat-Analoga. Seine breite Gewebeverteilung bedeutet, dass MRP5-Hemmung potenziell die Arzneimittelverteilung in mehreren Kompartimenten beeinflussen kann. Wichtige Substrate: cAMP, cGMP, PMEA, Fluoreszein. Weniger gut charakterisiert als MRP1–4; dieses Kit ermöglicht systematisches in-vitro-Profiling.

Technische Spezifikationen

Anwendungsgebiete

Assay-Prinzip

Inside-Out-Membranvesikel präsentieren die zytoplasmatische Seite des Transporters dem Assaypuffer und ermöglichen so ATP-abhängige Substrataufnahme in das Vesikelinnere. Vesikel mit Testverbindung und Probesubstrat in Gegenwart von ATP (Transport) oder AMP (Hintergrundkontrolle) inkubieren. Reaktion mit kaltem Waschpuffer stoppen, Vesikel durch Filtration trennen und akkumuliertes Substrat per LC-MS/MS, Radiolabel oder Fluoreszenz quantifizieren. Das ATP/AMP-Verhältnis bestimmt das Assay-Fenster für die zuverlässige IC₅₀-Bestimmung.

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Häufige Fragen

Wie unterscheidet sich MRP5 von MRP4 bei der Substratselektivität?

MRP4 und MRP5 teilen einige Substrate (cAMP, cGMP, PMEA), unterscheiden sich aber in Expressionsmustern und Transportkinetik. MRP4 ist mehr renal-dominant; MRP5 ist ubiquitär mit besonders bemerkenswerter ZNS/Herz-Expression. Das parallele Laufen beider Kits bietet umfassendes Nukleotidanalogon-Profiling.